Wistar大鼠

利用CRISPR/Cas9技術(shù)將THY1.1-BRAINBOW2.1定點敲入大鼠ROSA26位點。

在神經(jīng)科學(xué)和發(fā)育生物學(xué)中，隨機多色標(biāo)記是一種常用的技術(shù)。這種技術(shù)是構(gòu)建出含多色熒光蛋白（XFP）的重組載體，并利用它來標(biāo)記器官或生物體。通過載體上的隨機重組，細胞呈現(xiàn)出一種獨特的顏色，并且后代都保留這種顏色。哈佛大學(xué)的Jeff W. Lichtman研究小組用它來標(biāo)記小鼠小腦中的神經(jīng)元，將其命名為Brainbow。Brainbow 1.0版使用紅色熒光蛋白（RFP）、黃色熒光蛋白（YFP）和青色熒光蛋白（CFP）。Brainbow 1.1版則加入了橙色熒光蛋白（OFP）。Brainbow利用Cre/lox系統(tǒng)來標(biāo)記神經(jīng)元。編碼熒光蛋白的基因與單個啟動子串聯(lián)在一起，但只有緊挨著啟動子的基因能夠表達。在Brainbow 1.0版和1.1版中，緊挨著啟動子的分別是RFP和OFP，因此細胞在默認情況下發(fā)出紅色或橙色熒光，直到重組發(fā)生。Cre介導(dǎo)的重組允許下游的其他基因表達，讓大腦神經(jīng)元如彩虹般絢爛。

用于目的基因的熒光觀察。